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Analyse von Würmern für Portland


Über die Anwesenheit von Bakterien in Tumoren wurde vor etwa fünfzig Jahren berichtet. About the presence of bacteria in tumors was reported about fifty years ago.

Numerous publications occupied the previous clinical findings that human patients were surgically removed in tumors, an unexpectedly large number Würmer in Windeln bacteria was discovered. Forscher vertreten die Auffassung, dass chronische Infektionen für eine Prädisposition von Zellen für ein bösartiges Wachstum Analyse von Würmern für Portland können.

Scholars believe that chronic infections of a Analyse von Würmern für Portland of cells can provide a malignant growth.

Chronische Infektionen mit verschiedenen Stämmen von Chlamydia sind mit Lungenkrebs und Gebärmutterhalskrebs sowie bösartigen Lymphomen in Zusammenhang gebracht worden.

Chronic infections with different strains of Chlamydia have Analyse von Würmern für Portland associated with lung cancer and cervical cancer, and malignant lymphoma. Ein anderer gut beschriebener Zusammenhang zwischen der Anwesenheit spezifischer Bakterienarten und der Entwicklung von Krebs ist Helicobacter pylori in Patienten mit Magengeschwüren.

Another well-described relationship between the presence of specific types of bacteria and the development of cancer is Helicobacter pylori in patients with peptic ulcer. In Analyse von Würmern für Portland with duodenal ulcers and gastric adenocarcinomas was an increased concentration of antibodies associated with H. Diese Beobachtungen zeigen eine gleichzeitige Anwesenheit von Bakterien an Tumorstellen; These observations demonstrate a concomitant presence of bacteria at tumor sites; es war jedoch noch nicht klar, ob die Mikroorganismen die Ursache für die Tumorbildung sind oder ob die tumorösen Gewebe empfänglicher Analyse von Würmern für Portland eine Besiedlung mit Bakterien sind.

However, it was not clear whether the microorganisms are the cause of tumor formation or whether the tumorous tissues are more susceptible to colonization by bacteria.

Streng anaerobe Bakterien, Clostridium pasteurianum, die Mäusen intravenös injiziert wurden, replizierten selektiv in dem Tumor, was auf eine hypoxische Mikroumgebung in dem nekrotischen Zentrum hinwies. Strictly anaerobic Analyse von Würmern für Portland, Clostridium pasteurianum, the mice were injected Analyse von Würmern für Portland, replicated selectively in the tumor, indicating a hypoxic microenvironment in the necrotic center.

Intravenous injection of attenuated Salmonella typhimurium mutants resulted according to histological and bacteriological analyzes to increased Bakterientitern in the tumor tissues compared to the other organs of mice. In ähnlicher Weise wurde bereits über die Anwesenheit von Viruspartikeln in operativ entfernten humanen Brusttumoren berichtet. Similarly, in reported the presence of virus particles in excised human breast tumors. Vor kurzem wurde auf der Basis von Polymerasekettenreaktionsdaten PCR das humane Papilloma-Virus mit here Tumoren und ösophagealem Krebs, Brustkrebs und am häufigsten Gebärmutterhalskrebs in Zusammenhang gebracht.

Recently, the human papilloma virus has been associated with anogenital tumors and esophageal cancer, breast cancer and cervical cancer most often based on polymerase chain reaction data PCR.

In addition, about the presence of the hepatitis C virus in human hepatocellular carcinoma, Epstein-Barr virus in squamous cell carcinoma in the Kinura's disease, mouse mammary tumor virus-like particles MMTV in human breast cancer, SV40 virus in simian astrocytomas, and the herpes virus in tortoise fibropapilloma reported.

Die Konzentration an Viruspartikeln in den Tumoren zeigte überraschenderweise Schwankungen zwischen den Patienten. The concentration of virus particles in the tumors showed surprisingly variations between patients. In contrast to tumor tissues no virus particles were found in tumor-free areas of the Speiseröhrenepithels the same patient, indicating that the virus particles are Analyse von Würmern für Portland exclusively in the tumor tissues. Es Analyse von Würmern für Portland demnach keine Grundlage für die Verwendung derartiger Mikroorganismen für die Diagnose oder die Therapie von Tumoren.

There was therefore no basis for the use of such microorganisms for the diagnosis or treatment of tumors. Magnetic Resonance Imagingfehlt die Empfindlichkeit und die Spezifität, und therapeutische Verfahren, zum Beispiel die Chirurgie, sind invasiv und nicht sehr empfindlich. Magnetic Resonance Analyse von Würmern für Portlandthe sensitivity and specificity and therapeutic procedures, such as surgery missing are invasive and not very click at this page. Es ist daher Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Mittel für die effiziente und zuverlässige Diagnose sowie die Therapie von Tumoren anzugeben, mit dem die Nachteile der diagnostischen und therapeutischen Ansätze, die zur Analyse von Würmern für Portland verwendet werden, überwunden werden.

It is therefore an object of the present invention to provide a means for the efficient and reliable diagnosis, and therapy of tumors with which overcomes the disadvantages of the diagnostic and therapeutic approaches that are currently used.

According to the present invention this is achieved by the subject matters defined in the claims. Wenn Vaccinia-Viren LIVP-Stammdie das lichtemittierende Fusionsgenkonstrukt rVV-ruc-gfp tragen, intravenös in nackte Mäuse injiziert wurden, wurde festgestellt, dass die Viruspartikel innerhalb von 4 Tagen aus allen inneren Organen entfernt wurden, was durch die Löschung der Lichtemission nachgewiesen wurde.

When vaccinia virus LIVP strain the light emitting fusion gene gfp rW-rac-wearing, were injected intravenously into nude mice, it was found that the virus particles were removed within 4 days from all internal organs, which by the deletion light emission was detected.

Wenn im Gegensatz hierzu der Verbleib Analyse von Würmern für Portland injizierten Vaccinia-Viren in ähnlicher Weise in nackten Mäusen verfolgt wurde, die Tumore trugen, die aus subkutan implantierten C6-Rattengliomzellen gewachsen waren, wurde festgestellt, dass Viruspartikel langzeitig in den Tumorgeweben zurückgehalten Analyse von Würmern für Portland, was zu einer anhaltenden Lichtemission führte.

In contrast, when the fate of the injected vaccinia virus was monitored in a similar way in nude mice bearing tumors grown from subcutaneously implanted C6 rat glioma cells, it was found that virus particles were long-term retained in the tumor tissues, resulting in a sustained light emission resulted. The presence and increasing the amount of the virus-encoded fusion proteins in the same tumor were monitored Analyse von Würmern für Portland live animals by the GFP fluorescence was Analyse von Würmern für Portland under a stereomicroscope and by the luciferase-catalyzed light emission was detected under a low light video imaging camera.

The tumor-specific light emission was detected 4 days after viral injection into nude Analyse von Würmern für Portland bearing subcutaneous C6 Gliomimplantate whose size in the range Analyse von Würmern für Portland 25 to mm 3 was. Das Signal wurde nach die Schule von Würmern informieren 4.

Tag nach der Injektion intensiver und hielt 30 bis 45 Tage an, was auf eine fortgesetzte Virusreplikation hinweist. The signal became more intense after the 4th day after injection and held 30 to 45 days, indicating continued viral replication.

Die Anreicherung der rVV-ruc-gfp-Viruspartikel im Tumor wurde ebenfalls in nackten Mäusen gesehen, die subkutane Tumoren trugen, die sich aus Analyse von Würmern für Portland humanen PCProstatazellen entwickelten, und in Mäusen mit orthotopisch implantierten humanen MCFBrusttumoren. The enrichment of rW-rac-gfp click particles in the tumor was also seen in nude mice bearing subcutaneous tumors developed from implanted human PC-3 prostate cells, and in mice with orthotopically implanted MCF-7 human breast tumors.

Querschnitte eines C6-Glioms ergaben, dass die Lichtemission in "Flecken" im Randbereich des Tumors, in dem sich die schnell teilenden Zellen befinden, angehäuft war. Further, intracranial C6-Rattengliomzellimplantate presented in immunocompetent rats and MB murine bladder tumor cell implants in C57 mice objectives of the vaccinia virus represents. Im Gegensatz hierzu ergaben Querschnitte von Brusttumoren, dass fluoreszierende "Inseln" über den Tumor verteilt waren.

In contrast, cross sections of breast tumors revealed that fluorescent "islands" were distributed throughout the tumor.

Zusätzlich zu primären Brusttumoren wurden kleine metastatische Tumore ebenfalls im kontralateralen Brustbereich sowie in Knoten auf der exponierten Lungenoberfläche extern nachgewiesen, was auf die Metastase in die kontralaterale Brust und Lunge hinwies. In addition to primary breast tumors, small Analyse von Würmern für Portland tumors were detected externally in the contralateral breast region, as well as also in the node on the exposed lung surface, indicating the metastasis to the contralateral breast and lung.

Zusammenfassend können lichtemittierende Zellen oder Mikroorganismen, zum Beispiel Vaccinia-Viren, verwendet werden, um primäre und metastatische Tumoren nachzuweisen und zu behandeln. In summary, can be, for example vaccinia viruses, using light-emitting cells or microorganisms, in order to detect primary and metastatic tumors and to treat. Similar results were obtained with light-emitting bacteria Salmonella, Vibrio, Listeria, E. In der Hautwunde eines intravenös injizierten Tiers nimmt die bakterielle Lichtemission zu und bleibt bis zu sechs Tage nach der Injektion nachweisbar.

In the skin wound of an intravenously injected animal bacterial light emission increases and remains detectable up to six days after injection. In nude mice bearing tumors that developed from implanted C6 glioma cells, light emission thirty-six hours Analyse von Würmern für Portland the ingestion of the bacteria had completely disappeared from the Analyse von Würmern für Portland, similar to mice without tumors.

Allerdings wurde achtundvierzig Stunden nach der Injektion unerwarteterweise eine starke, schnell zunehmende Lichtemission beobachtet, die nur von den Tumorbereichen stammte. However forty-eight hours was observed a strong, rapidly increasing light emission after the injection, unexpectedly, which originated only from the tumor regions.

Diese Beobachtung weist auf eine kontinuierliche Replikation der Bakterien im Tumorgewebe hin. This observation indicates a continuous bacterial replication in the tumor tissue. The extent of light emission depends on the bacterial strain. Der Vorgang des Einwanderns "homing in" zusammen mit der anhaltenden Lichtemission wurde auch in nackten Mäusen nachgewiesen, die Prostata- Blasen- und Brusttumore trugen.

The process of Analyse von Würmern für Portland "homing in" together with the sustained light emission was also detected in Analyse von Würmern für Portland mice bearing prostate, bladder and breast tumors. Zusätzlich zu primären Tumoren konnten auch metastatische Tumore sichtbar gemacht werden, was beispielhaft am Brusttumor-Modell gezeigt wurde. In addition to primary tumors and metastatic tumors could be visualized, which was exemplified in the breast tumor model.

Die tumorspezifische Lichtemission wurde auch in immunkompetenten CMäusen mit Analyse von Würmern für Portland sowie in Lewis-Ratten mit Hirngliomimplantaten beobachtet. The tumor-specific light emission was also observed in immunocompetent C57 mice with bladder tumors as well as in Lewis rats Analyse von Würmern für Portland Hirngliomimplantaten.

Once they were in the tumor, bacteria was not observed that they have been released back into the bloodstream and then populated implanted here in the same animal for the light emitting.

Weiterhin wurde für Säugetierzellen, die das Ruc-gfp-Fusionsprotein exprimieren, beobachtet, dass sie nach der Injektion in die Blutbahn ebenfalls in Gliomtumore einwandern und sich dort vermehren. Further, mammalian cells expressing the Ruc-GFP fusion protein observed that they also migrate and after injection into the bloodstream in glioma tumors proliferate there.

Diese Systeme haben die folgenden Vorteile: Derartige Proteine sind dem Fachmann wohl bekannt, und weitere Beispiele für geeignete Proteine werden weiter unten angegeben. Such proteins are the expert well known, and further examples Analyse von Würmern für Portland suitable proteins are given below.

Beispiele für brauchbare Mikroorganismen sind Bakterien und Viren. A vaccinia virus is useful for the compositions according to the invention, provided it replicates in the organism is the organism nonpathogenic, is weakened, for example, and is recognized by the Analyse von Würmern für Portland system of the organism, etc.

Examples of useful microorganisms are bacteria and viruses. Der Ausdruck "Bakterien", wie er hier verwendet wird, bezieht sich auf Bakterien, die per se nicht auf einen Tumor gerichtet sind dh sie können nicht zwischen einer kanzerösen Zelle oder einem kanzerösen Gewebe und dem entsprechenden nicht kanzerösen Gegenstück dieser Zelle oder dieses Gewebes unterscheidenda die Ergebnisse der Versuche, die zu der vorliegenden Erfindung geführt haben, zeigen, dass die Bakterien, etc.

The term "bacteria" as used herein, refers to bacteria that are not addressed per se to a tumor ie, they can not distinguish between a cancerous cell or cancerous tissue and the corresponding non-cancerous counterpart of that cell or tissue are differentsince the results of the experiments that have led to the present invention show that the bacteria, etc.

Eine Liste der Kandidatenbakterien, Analyse von Würmern für Portland für die gleichen Zwecke wie die vorliegende Erfindung brauchbar sein könnten und die nicht auf den Tumor gerichtet sein könnten, wird in der Tabelle 1 weiter unten angegeben. A list of candidate bacteria that could be useful for the same purposes as the present invention and which could not be directed to the tumor is given in Table 1 below. Der Fachmann kann derartige Bakterien, die Analyse von Würmern für Portland auf den Tumor gerichtet sind, problemlos durch allgemein verfügbare Verfahren identifizieren, zum Beispiel durch die Verfahren, die in Abschnitt 6.

Bei diesen Bakterien handelt es sich vorzugsweise um interzelluläre Bakterien, wie E. In these bacteria, it is preferably intercellular bacteria, such as E. In dem Verfahren der vorliegenden Erfindung sind die Viren nicht auf den Tumor gerichtet. In Analyse von Würmern für Portland process of the present invention, the viruses are not directed at the tumor. The ligand can be a protein including large and small peptides, antibodies, etc.

Virtually every known ligand-receptor pair for tumor marker protein is useful in the inventive method. Für die Erhöhung der Spezifität können die mutierten Proteinliganden oder die Analoga, falls es sich um eine chemische Verbindung handelt oder die mutierten Ligandenrezeptoren vorzugsweise genetisch oder chemisch so manipuliert werden, dass sie nicht Analyse von Würmern für Portland beliebige endogene Moleküle binden.

To increase this web page specificity of the mutated protein ligand or the analogues if it is a Analyse von Würmern für Portland compound is or the mutated ligand receptors are preferably genetically or chemically manipulated so that it does not bind to any endogenous molecules.

Dieser Ligand ist z. This ligand is z. As the manipulated vaccinia viruses carrying the receptor protein gene constructs. Radionuklide können für die herkömmliche Tumorszintigraphie, PET und möglicherweise die interne Radiotherapie von Tumoren verwendet werden. Radionuclides can be used for conventional tumor scintigraphy, PET and possibly internal radiotherapy of tumors. Andere Radionuklide, die z. Other radionuclides which z.

In experiments in which small laboratory animals are used, the imaging of please click for source using a micro-PET instrument is performed commercially for. Concorde Microsystems Knoxville, TN is available.

Beispiele für brauchbare Radionuklid-markierte Mittel sind das 64 Cu-markierte manipulierte Antikörperfragment Wu et al. Examples of useful radionuclide-labeled agents are the 64 Cu-labeled engineered antibody fragment Wu et al. For the purposes of the Analyse von Würmern für Portland ligand in tumor detection, the genes encoding the receptor proteins are capable of binding to the ligand supplied by intravenously injected Vaccinia virus according to the present invention.

Da es in den Beispielen weiter unten gezeigt werden konnte, dass bestimmte intrave nös injizierte Bakterien, Viren und Säugetierzellen spezifisch in den Tumoren replizieren, markiert die Expression der Rezeptorproteine in den Tumoren die Tumore für das gezielte Anbinden des Radionuklidmarkierten Liganden.


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